Boală articulară de la șoarece

COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) - Synevo

Osteoartrita Abstract Osteoartrita OAcaracterizată prin sinteza insuficientă a matricei extracelulare și degenerarea cartilajului, este cunoscută ca o boală incurabilă, deoarece patogeneza acesteia este slab elucidată. În acest studiu, am investigat funcția specifică a miRa în patofiziologia OA utilizând modele OA de șoarece. Am constatat că degenerarea articulară a cartilagiilor șoarecilor miRa knockout KO a fost atenuată în comparație cu cea a șoarecilor de tip sălbatic WT în modelele OA induse spontan și instabilitate.

Boli ovine – A.N.S.V.S.A.

Demonstrăm faptul că citokinele pro-inflamatorii miRa au indus suprimarea expresiei genelor asociate cu matricea cartilajului. Am identificat suplimentar delta protein kinazei II Camk2d și proteina fosfatază 3, subunitatea de reglare B, izoforma beta Ppp3r2, cunoscută și sub denumirea de calcineurin B, tip II ca mișcări esențiale ale miRa în reglarea homeostaziei cartilajelor.

Mai mult, am constatat că șoarecii OA indusă chirurgical tratați cu un inhibitor miRa au atenuat semnificativ durerea de durere rupe toate articulațiile cartilajului articular prin vizarea Camk2d și Ppp3r2.

Aceste rezultate sugerează că miRa are un rol crucial în menținerea homeostaziei cartilajului. Boală articulară de la șoarece miRa în condrocite poate fi o strategie terapeutică potențială pentru ameliorarea OA.

  • Este detectabil atât în sânge cât şi în lichidul sinovial.
  • Condropatia - Recuperare Medicala si Sportiva - PanSportMedical
  • COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) - Synevo
  • Femeile sufera de doua ori mai frecvent de artroza decat barbatii.

Principal Osteoartrita OA este cea mai răspândită boală musculo-scheletică la vârstnici și se preconizează că va afecta 60 de milioane de oameni în Statele Unite până în Acest rezultat sugerează că miRNA au un rol critic în dezvoltarea scheletului. Mai multe miRNAs au fost identificate implicate în reglarea homeostaziei cartilajelor. Este important ca un dezintegrin și o metalopeptidază cu motivul trombospondin tip 1 Adamts5 să fie identificat ca o boală articulară de la șoarece directă a miR, iar șoarecii miR knockout KO dezvoltă modificări mai severe ca OA comparativ cu tipul sălbatic WT șoareci.

Se pare că downregularea acestor miRNAs este responsabilă de degradarea cartilajului sub efectele IL MiRa este exprimată intens în cartilaj în OA timpuriu și este puternic reglată în sus prin stimularea IL-1 p în culturile normale de cartilagiu uman de cartilaj articular.

Cu toate acestea, rolul exact al miRa în patogeneza OA rămâne necunoscut. Alte descoperiri recente sugerează că miRa poate contribui la patogeneza OA prin afectarea căii de semnalizare TGF- β prin țintirea Smad4 și creșterea apoptozei. Boală articulară de la șoarece acest studiu, am căutat boală articulară de la șoarece determinăm rolurile miRa privind homeostazia cartilajului și dezvoltarea OA. Șoarecii KO MiRa și șoarecii WT compatibili genetică genetică au fost utilizați pentru a dezvolta OA de genunchi cu sau fără instabilitate indusă de genunchi.

Obiectivele moleculare ale miRa și calea potențială implicată în patogeneza OA au fost investigate în continuare. La vârsta de 12 luni, șoarecii WT au prezentat o suprafață artificială zdrobită și pierderea glicozaminoglicanului în condylele femurale și pe platourile tibiale.

Dimpotrivă, modificările osteoartritice au fost mai puțin severe la șoarecii miRa KO corespunzători vârstei, așa cum se poate observa printr-o colorare mai mare a safraninei O Figura 1a. Șoarecii miRa KO vechi de 12 luni au prezentat o reducere a formării osteofitei comparativ cu șoarecii WT figurile 1c și d.

COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein)

Mai mult decât atât, procentele de condrocite MMP13 și colagen de tip colagen Col10a1 au fost semnificativ mai scăzute la șoareci KO vechi de 12 luni decât șoarecii WT cu vârsta corespunzătoare Figurile 1e și g.

Aceste rezultate au indicat faptul că deficiența miRa a atenuat degenerarea cartilajului în modelul spontan de OA. Renunțarea genetică a miRa suprimă OA spontan.

Cartilaj roșuos albastru ; F, femur; T, tibie.

timpul de tratament al luxației genunchiului

Scară de bare, μm. Secțiunile au fost contracarate cu hematoxilină, nucleu albastru. Soarecii WT au prezentat o pierdere severă de proteoglican și o degenerare articulară a cartilajului în articulațiile genunchiului la 4 săptămâni după operația DMM, dar modificările osteoartritice au fost mai puțin severe la articulațiile genunchiului miRa KO figura 2a. În concordanță cu această constatare, imunostabilizarea a demonstrat că expresia proteică a colagenului de tip X și Mmp13 a fost semnificativ redusă la șoarecii miRa KO comparativ cu cea a șoarecilor WT.

Navigare principală

Acest rezultat a indicat că degradarea cartilajului poate fi suprimată figurile 2c și e. Aceste rezultate au arătat în mod colectiv că deficiența miRa la șoareci inhibă degenerarea cartilajului articular în timpul dezvoltării secundare a OA.

Ștergerea genetică a miRa ameliorează distrugerea cartilajului în modelele OA induse de instabilitate. F, femur; T, boală articulară de la șoarece.

Scări de bare, μm.

boală articulară de la șoarece

NS, nu este semnificativă între grupurile indicate Imagine de dimensiune completă MiRa exacerbează factorii proinflamatori induși suprimând expresia genelor asociate cu matricea cartilajelor Am speculat că micromediul inflamator al OA poate fi responsabil pentru reglarea miRa. Am constatat că miRa a fost semnificativ reglată în cartilajul articular de șoarece în grupul DMM comparativ cu grupul operat în mod simulat la 4 săptămâni după operație Figura 3a și au fost găsite și nivele mai ridicate de TNF- a și IL-1 β în grupuri DMM Figura 3b.

Am constatat că IL-1 3IL și TNF- a au modificat expresia miRa în condrocitele primare de șoarece, în timp ce celelalte citokine inflamatorii nu au avut niciun efect asupra exprimării miRa Figura 3d. Dimpotrivă, distrugerea miRa cu inhibitorul Lenti a a modificat semnificativ expresia proteinei Col2a1 și Sox9 și a salvat parțial inhibarea ambelor gene anabolice prin citokine pro-inflamatorii Figura 3f.

La șoarecii cu destabilizare la genunchi, nivelele de expresie ale Sox9 și Col2a1 au fost mai mari la șoarecii miRa KO comparativ cu șoarecii WT Boală articulară de la șoarece 3g și h. Aceste rezultate au demonstrat colectiv că miRa, care este indus de citokine proinflamatorii, exacerbează suprimarea anabolismului cartilajului în patogeneza OA.

MiRa inhibă exprimarea genelor asociate cu matricea cartilagiilor. Probele au fost colectate la 4 săptămâni după operație. Scara de bare, 50 μm.

  • Recenzii despre complexul farmaceutic glucosamina condroitina
  • Tratamentul prin acupunctură al artrozei
  • Dureri la nivelul picioarelor de șold

Cantitățile de proteină de Col2a1 și Sox9 au fost determinate prin Western blot. Pentru cuantificare, expresia proteinei a fost normalizată prin cantitatea de proteină din prima bandă utilizând software-ul Image J 1. Datele sunt reprezentative pentru trei experimente independente în df. Douăsprezece gene au fost validate pe baza regiunii seminței miRa în regiunea 3'-netranslatată UTR a genei candidate, care este conservată evolutiv la mamifere Figura 4a.

boală articulară de la șoarece

Analiza QPCR a arătat că expresia majorității acestor gene candidat poate fi suprimată prin amplificarea funcției miRa la condrocitele de șoarece Figura 4b. Am construit reporteri de luciferază care conțin secvențe WT 3'-UTR ale genelor candidate, care includ situsul de legare miRa pentru evaluarea direcționării directe prin miRa. Deoarece expresia Tgif1Camk2d și Ppp3r2 în cartilaj au fost considerabil mai mari la șoarecii KO comparativ cu șoarecii WT ambele cu destabilizarea genunchiului Figurile 4e și gam investigat în continuare dacă aceste gene sunt reglate prin legarea directă a miRa.

Mai mult decât atât, am constatat că supraexprimarea Tgif1 a crescut semnificativ nivelul Ppp3r2 Figurile suplimentare 2B-D. Acest rezultat a confirmat în continuare faptul că miRa ar putea inhiba exprimarea genelor legate de matricea cartilajului prin țintirea Tgif1, Camk2d și Ppp3r2.

MiRa vizează Tgif1, Camk2d și Ppp3r2. Douăsprezece gene au fost validate pe baza regiunii de semințe de miRa în 3'-UTR a genei candidate care este conservată evolutiv la mamifere. Culorile și numerele de gradient indică schimbarea în repetate boală articulară de la șoarece a expresiei genei în condrocitele de șoarece transfectate cu inhibitorul miRa comparativ cu martorul, determinat prin microarray. Rezultatele au fost normalizate prin citirea luciferazei interne a fluturilor de foc.

Pentru cuantificare, expresia proteinei a fost normalizată de cantitatea de proteină din prima bandă.

Account Options

NS, nu este semnificativă între grupurile indicate Imagine de dimensiune completă Reglarea nivelului miRa în cartilaj are efect terapeutic asupra OA Pentru a investiga dacă reglarea miRa în OA a avut un efect terapeutic asupra bolii OA, am efectuat injectarea intraarticulară IA a șoarecilor operați cu DMM cu lentivirusuri care codifică miRa, secvența antagonistă miRa sau lentivirusul de control corespunzător săptămânal pentru 3 săptămâni după 1 săptămână după operație Figura 5a.

Livrarea miRNA la condrocite in vitro a fost confirmată prin analizarea expresiei miRa în condrocitele șoarecilor infectate cu lentivirusuri care codifică miRa, în timp ce livrarea in vivo a fost confirmată prin imunizarea pielii GFP după injectarea IA a lentivirusului integrat cu gena GFP figurile suplimentare 3A și B.

Antrax — boală comună mai multor specii DescriereProfilaxie Antraxul este o boala infecţioasă, produsă de Bacillus anthracis, ce afectează majoritatea speciilor de mamifere domestice sau sălbatice şi omul.

Am constatat că șoarecii DMM tratați cu miRa Lenti-mimic au agravat semnificativ extensia degenerării cartilajului articular în comparație cu virusul martor. În schimb, administrarea inhibitorului miRa inhibitorul Lenti a a atenuat semnificativ degenerarea cartilajului articular cauzată de intervenția chirurgicală DMM. Mai mult, expresia proteinei Col10a1 a fost semnificativ crescută prin supraexpresia miRa și scăzută prin inhibarea miRa Figurile 5d și edar diferențele în expresia Mmp13 nu au fost semnificative figura 3C suplimentară.

Livrarea miRa în condrocite articulare a afectat substanțial dezvoltarea OA. Boală articulară de la șoarece constatat că Camk2d și Ppp3r2 s-au exprimat abundent la cartilajul articular și placa de creștere la șoareci WT cu vârsta de 3 luni, dar nivelul lor de exprimare a fost semnificativ scăzut în cartilajul articular după operația DMM figurile suplimentare 3D și E. Expresia Tgif1 este prea scăzută pentru a fi detectată. Nivelurile de expresie ale Camk2d și Ppp3r2 din cartilajul articular au fost reduse semnificativ la șoarecii WT de 12 luni în comparație cu șoarecii WT de 3 luni vechi.

Această reglare în funcție de vârstă a Camk2d și Ppp3r2 a fost atenuată semnificativ la șoarecii KO comparativ cu cea a șoarecilor WT figurile 6a și c.

De asemenea, am observat că expresia Dureri articulare și musculare și virus și Ppp3r2 în celulele măduvei osoase de șoareci KO miRa vechi de 3 luni a fost mult mai mare decât cea a șoarecilor WT maturici în funcție de vârstă Figura 3F complementară. Expresia proteică a Camk2d și Ppp3r2 a fost reglată în jos prin supraexpresia miRa și crescută dureri de șold dimineața după somn inhibarea miRa figurile 6f și ha indicat că acestea sunt țintele directe ale boală articulară de la șoarece in vivo, deoarece secvențele lor 3'-UTR conținând situs de legare miRa.

Ca parte a subunității de reglare a calcineurinei, Ppp3r2 este necesar pentru activarea factorului nuclear al proteinelor T 20care au fost exprimate semnificativ mai mare la celulele cartilajului hialin și la măduva osoasă a șoarecilor miRa KO comparativ cu vârstă potrivită pentru șoarecii WT. Camk2d și Ppp3r2 sunt ținte directe ale miRa in vivo. Pentru miRNA-urile reglate prin citokine proinflamatorii, rapoartele anterioare sugerează că inducerea MMP și a enzimelor catabolice de către IL-1 β a fost reglată prin suprimarea miR, de exemplu miR ținte Adamts5care mediază degenerarea cartilajului articular.

Cartilajul este un tesut al organismului flexibil si rezistent, cu o varietate de functii: - participa la formarea articulatiilor asigura mobilitarea articulara, congruenta articulara ; - formeaza structura: - oaselor cartilajele de crestere ce sunt transformate in os la maturitate ; - pavilionului urechilor, nasului; - meniscuri; - discuri intervertebrale etc.

Totuși, funcția miRNAs, care sunt reglate în sus prin tratamentul cu citokine proinflamatorii în OA, rămâne ambiguă. Se remarcă faptul că miRa, indusă ca răspuns la stimularea mediatorului lipopolizaharidic LPS și mediator pro-inflamator, 17 a fost puternic exprimată în țesutul sinovial uman RA și mai puțin exprimată în țesutul OA.

Am speculat că mediul inflamator al OA poate fi responsabil pentru reglarea miRa. IL- 1p a indus cele mai ridicate niveluri de miRa în condrocite decât cele ale TNF- a și IL, ceea ce indică faptul că reglarea în sus a miRa în cartilajul erodat este corelată cu citokinele inflamatorii, în special IL-1 β sintetizate de condrocitele rezidente. Trebuie remarcat faptul că leziunile mecanice de presiune și citokinele proinflamatorii secretate de sinoviu sau meniscus sunt potențial implicate în inducerea miRa în cartilajul OA.

Totuși, am descoperit că eliminarea expresiei miRa la șoareci prin îndepărtarea secvenței precursoare miRa în genomul de șoarece nu a exacerbat distrugerea cartilajului articular.

boala perechea articulara

Dimpotrivă, KO a boală articulară de la șoarece in vivo a atenuat semnificativ degenerarea cartilajului OA cauzată de îmbătrânire sau încărcare mecanică imbalantă, sugerând că miRa poate servi un alt rol decât restrângerea inflamației. Am constatat că inhibarea expresiei endogene a miRa în condrocitele primare de șoarece a îmbunătățit semnificativ nivelele de Col2a1 și Sox9, markeri bine cunoscuți ai condrocitelor mature și factorii pro-inflamatori parțial salvați, indusă de inhibarea ambelor gene anabolice.

Citokinele proinflamatorii induse miRa au întărit suprimarea mediată de citokine a genelor anabolice, sugerând că miRa este responsabil pentru homeostaza cartilajului dezordonată.

Rolul miRa în OA a fost boală articulară de la șoarece în continuare prin experimentul nostru terapeutic in vivo în care șoarecii DMM tratați cu inhibitor miRa sau miRa au agravat sau ameliorat semnificativ distrugerea cartilajului articular respectiv.

Studiul nostru oferă prima perspectivă că reglarea nivelului miRa in vivo are un efect terapeutic pentru OA. Am elucidat în continuare mecanismul miRa suprimă anabolismul cartilajului. Am identificat țintele miRa, și anume Tgif1, Camk2d și Ppp3r2. În acest studiu, am identificat că Camk2d și Ppp3r2 au fost ținte directe ale miRa în dezvoltarea OA. Exprimarea ectopică a Camk2d și Ppp3r2 a îmbunătățit semnificativ cantitățile de proteină de Col2a1 și Sox9.

Mai mult decât atât, expresia Camk2d și Ppp3r2 în cartilajul normal este localizată în principal la cartilajul hialinic sau placa de creștere, rareori distribuită la cartilajul calcificat sau cartilajul OA.

Acest rezultat sugerează că Camk2d și Ppp3r2 pot fi necesare pentru a menține fenotipul de condrocite maturi. Deși mecanismul specific prin care Camk2d și Ppp3r2 reglează expresia Col2a1 sau Sox9 rămâne neclar, calea calcineurin-NFAT poate fi implicată în reglarea homeostaziei cartilajului.

Boli ovine

Am constatat că șoarecii miRa KO au exprimat mai mult activat Nfatc1 și NFatc2 decât șoarecii WT în cartilajul articular, în special în zona cartilajului hialin. Calea calcineurin-NFAT a avut un rol critic în promovarea chondrogenesisului prin inducerea Sox9, 41, 42 sau prin activarea expresiei proteinei morfogenetice osoase. Studiul suplimentar a arătat că Nfatc2 legat de regiunile promotor ale genelor Acan, Col2a1, Mmp13 și Tnfa în condrocitele articulare ale boală articulară de la șoarece vârstnici, 45 a sugerat că schimbările mari în nivelurile Sox9 și Col2a1 cauzate de supraexprimarea și inhibarea miRa în condrocite in vitro poate atribui reglementării lui Nfatc2 de către miRa.

Trebuie remarcat faptul că în acest studiu există câteva limitări. De exemplu, trebuie găsită o livrare mai sigură a miRNA la condrocitele articulare in vivo deoarece am descoperit că un șoarece a murit o săptămână după ultima injecție în experimentul terapeutic. Speculam efectul secundar nedorit al lentivirusului este cauza probabilă.

Mai mult, rolul Tgif1 în patogeneza OA a fost parțial ignorat deoarece nu am reușit să îl detectăm in vivo. Cu toate acestea, Tgif1 poate avea același efect ca și Camk2d și Ppp3r2, deoarece supraexprimarea Tgif1 în condrocite a mărit considerabil expresia Ppp3r2.

durere în toate articulațiile însoțite de febră

Interesantarticole